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Beta多样性分析

主成分分析:

共线率越高,越能反应原始信息,图中不同颜色反应不同样品

 

 

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横坐标代表按照丰度排序的序号,纵坐标代表OTU的相对丰度

意义:(1)代表样品里面物种的丰富度,曲线末端对应横坐标值越高,该样品中OTU的数量越多,说明里面的物种越多。纵坐标越高,值越大,说明该样品中物种的丰富度越高

(2)曲线的平缓代表样品中物种均匀性高,陡峭代表样品中物种均匀性不好

 

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Lefse在不同组间寻找具有统计学差异的差异物种。然后再通过LDA做线性判别分析,找每个差异物种对组间差异的贡献。有LDA值表示组间差异的大小,LDA值越高,表明这一物种对组间差异值的贡献越大。

由里到外是界门纲目科属种。

 

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操作步骤:

一、样品间分析:选择样品--分类水平选择(OTU)---点击中心数字,确定,上面表格会展示共有OTU--点击花瓣上的数字,确定,上面表格会展示特有OTU

表格展现了OTU在不同样品中的序列条数,若某个OTU值为0,则该样品中不存在该OTU;图片展示了共有或特有OTU,需自己选择点击花瓣数字

二、组间分析:同上

 

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张雪琳 · 2020-08-18 · venn图 0

以颜色梯度反应物种在不同样品间的丰度差异,并根据物种的丰度相似性对样品和物种进行聚类

 

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一、样品间分析:选择样品---提交(分析时间较长)

图片从左到右分别表示了从高到低(界门纲目科属种)的分类学地位,饼图中不同的颜色表示不同的样品,饼图所在的位置展示了当前分支下无法继续分类的序列条数,饼图不同颜色的面积大小表示了在该位置的序列条数的高低

二、组间分析:同上

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操作步骤:

一、样品间分析:选择样品---提交(分析时间较长),图片从里到外分别表示了分类等级从高到低(界门纲目科属种),扇形面积大小表示了该分类等级的丰度信息,双击扇形可以把所有分类等级下的所有物种分类信息放大,查看该分类等级下的所有物种信息。

二、组间分析:同上

最后的分析结果可以保存和下载

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张雪琳 · 2020-08-18 · KRONA注释 0

基于代表序列,通过多序列比对构建物种间的系统进化关系

操作步骤:

一、样品间分析:选择样品---分类水平选择(genus水平或其他)---物种数量选择(微生物丰度20或其他,丰度比例1%或其他)---提交(分析时间较长),表格展示了所选的OTU、OTU在样品中的丰度的总和及该OTU的物种注释信息,图片有两种(环形进化树、常规进化树)

二、组间分析:同上

最后的分析结果可以保存和下载

 

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操作步骤:

一、样品间分析:选择样品---分类学水平选择(genus水平或其他)---提交,表格展示了物种的分类学等级及物种在三个样品中的相对丰度信息

图片三个顶点表示三个样品,不同的点是不同的属,点的大小表示属的相对丰度的大小,不同的颜色表示不同的门,某个点距离某个顶点越近,表示该物种的丰度在该顶点所代表的样品中越高。

二、组间分析:同上

最后的分析结果可以保存和下载

 

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一、样品间分析:选择样品---分类学水平选择(OTU水平或其他)---多样性指数选择(都选上)---提交

表格 展示了计算的各指数及其在95%可信区间下的最小值和最大值的结果分析

 

二、组间分析:选择样品---分类学水平选择(OTU水平或其他)---多样性指数选择(都选上)---组间差异检验方法,选择T检验或其他---提交

表格 展示了具体的指标信息、分组信息

第一行表示Shannon指数在各组之间的平均值,第二行表示Shannon指数在各组之间的标准差。

 

图片展示了alpha多样性指数在三组之间的差异性的情况,可以点击箭头看各个图片

 

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一、样品间分析:选择样品---分类水平选择(OTU或其他 )---提交

表格:样品ID、随机抽取的序列条数、当前抽取的序列条数下所得到的Shannon指数

图片:横坐标:随机抽取的序列条数;纵坐标:Shannon指数大小。不同颜色的线条表示不同的样品。

 

二、组间分析:同上

最后的分析结果可以保存和下载

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操作步骤:

一、样品间分析:选择样品---分类水平选择(OTU或其他)---提交

表格:OTU的ID、后面是没哟个OTU在不同样品中的序列条数

图片:横坐标:物种丰度从高到低的排序顺序;纵坐标:物种的相对丰度。曲线下降的平缓程度反映物种分布的均匀程度,曲线下降越平缓反映样品中物种分布越均匀。

二、组间分析:同上

最后的分析结果可以保存和下载

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操作步骤:

一、样品间分析:同下(组间分析会将不同样品标记不同的颜色,这个不会)

 

二、组间分析:选择样品---分类水平选择(OTU或其他)---提交

表格:样品坐标表(展示了每一个样品在第一轴、第二轴、第三轴的具体的坐标信息)

各坐标解释度表(反映了第一轴、第二轴、第三轴的贡献率)

图片:从三个层次反映PCA分析的结果(第一轴和第二轴;第一轴和第三轴;第二轴和第三轴)

点表示了不同的样品,点的颜色代表了分组信息;可以点击修改图片,选择是否选择样品名称,选择加圈(置信椭圆,有五个样品才可做这个),是否进行组间差异检验(任意选择一种),主标题(PCA),X轴标题(PC1),Y轴标题(PC2),点击确定

 

同一组样品添加了置信椭圆

 

最后的分析结果可以保存和下载

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张雪琳 · 2020-08-18 · PCA分析 0

多维空间的研究对象简化到低维空间进行定位、分析和归类。

操作步骤:

一、样品间分析:

选择样品---分类水平选择(OTU或其他)--- 距离算法的选择(计算样品与样品之间的距离,根据实际情况选择,这里选择binary jaccard)---提交

表格:样品、组和坐标信息

图片:点代表了不同的样品,不同颜色代表了不同的分组,可以修改图片,选择是否选择样品名称,选择加圈(置信椭圆,有五个样品才可做这个),是否进行组间差异检验(任意选择一种),主标题(NMDS),X轴标题(nmds1),Y轴标题(nmds2),点击确定

二、组间分析:同上

最后的分析结果可以保存和下载

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操作步骤:

一、样品间分析:选择样品--分类水平选择(OTU或其他)---样品聚类或排序(聚类或排序均可选,默认聚类)--距离算法选择(binary jaccard)------提交

表格展现了样品中距离矩阵的数据,数值越大,两样品之间的差异越大;

图片展示了每个样品的聚类结果,不同的颜色表示不同的物种的丰度,红色表示两两样品之间的差异大,蓝色表示两两样品之间的差异小

二、组间分析:选中treat1(对来自同一组的样品标记同一颜色),其他同上

最后的分析结果可以保存和下载

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进化分支图:黄色的点代表没有差异的物种,带有颜色的点代表差异物种;

LDA值分布柱状图:展示了所有物种的LDA值

丰度比较图:标记物种在多组

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张雪琳 · 2020-08-19 · lefse分析 0

使用非参数T检验方法研究两组样品微生物群落丰度的差异,

一、分析类型选择(只能进行两两组之间的分析):选择样品(添加新的分组类型,新建分组策略名称:treat2,左下角添加分组至分组池,在分组池创建两个分组,确认,选中我们创建的分组)—-分类水平选择(genus水平)--显著性P值(0.05)------提交

 

 

表格展现了物种名称、物种在第一组中的均值、方差、标准差、物种在第二组中的均值、方差、标准差,最后两列为P值和校正后的P值;

我们可以选择感兴趣的物种,点击上方在图片中展示选中的物种,图片中会显示该物种在两组之间差异的柱状图及物种的散点图。

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一、样品间分析:选择样品--分类水平选择(genus或其他)---距离算法选择(binary jaccard)----环境因子距离算法选择(手动或上传文件)----提交

表格展现了 环境因子名称、检验得到的r值(表明环境因子)、统计学检验的显著性;

二、组间分析:

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一、样品间分析:选择样品--分类水平选择(genus或其他)---物种数量选择(微生物丰度TOP:20)--聚类分析选择(选择物种聚类)--样品聚类或排序(样品聚类,若需要对样本排序,则选中,再手动对上面的样品进行排序)--相关性类型(SparCC或其他)---相关系数阈值(0.1)--显著性p值(0.05)-上传环境因子数据或手动写--提交

表格:相关性系数表展现了物种与环境因子的相关性系数;p值表表示了物种与环境因子之间相关性的显著性

相关性热图图片相关性以*表示

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目的:以网络图的形式展示了物种与物种之间的相关性

操作步骤:

一、样品间分析:选择样品--分类水平选择(genus或其他)---物种数量选择(微生物丰度TOP:80)--相关性类型(Spearman)---相关系数阈值0.1---显著性P值0.05---提交

表格展现了物种1、物种2、两物种之间相关性数值大小、二者之间相关性类型(+:二者正相关,-:二者负相关);

网络图图片,点表示不同的物种,连线表示物种之间有相关性、粗细表示相关性的强弱,红色表示正相关,绿色表示负相关

二、组间分析:

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